С.Е.Гостищева, Н.В.Абзаева, Д.А.Ковалев, А.В.Костроминов, А.М.Жиров, Е.Л.Ракитина, М.В.Костюченко, О.В.Логвиненко, Д.Г.Пономаренко, Д.В.Русанова, М.А.Иванова, Т.М.Гридина

ФКУЗ «Ставропольский противочумный институт» Роспотребнадзора, Ставрополь, Российская Федерация

Резюме: Для оценки поствакцинального противочумного иммунитета используют клеточные тесты in vitro с применением проточной цитометрии, которая предусматривает использование различных комплексов растворимых антигенов в качестве специфических активаторов иммунных клеток.
Цель исследования. Изучить качественный состав комплекса водорастворимых антигенов чумного микроба для стандартизации свойств препарата и применения его при оценке формирования поствакцинального противочумного иммунитета методом проточной цитометрии. В работе был изучен комплекс водорастворимых антигенов чумного микроба на основе вакцинного штамма Yersinia pestis EV линии НИИЭГ. Спектрофотометрию всех серий образцов водного раствора осуществляли в 10 повторах на спектрофотометре NanoDrop 2000С. Исследование белкового состава проводили методом капиллярного электрофореза. Хроматографический анализ делали в обращенно-фазовом режиме с применением стандартных образцов моносахаридов, для каждой серии получали 5 хроматограмм. Количественное определение белков и нуклеиновых кислот проводили методом специфической флуориметрии. Для оценки поствакцинального противочумного иммунитета определяли экспрессию рецепторов (CD25) на поверхности лимфоцитов при антигенспецифической стимуляции in vitro.
Результаты и выводы. В ходе исследования препарата были получены характерные хроматографические профили, показавшие наличие полисахарида, мономерами которого являются глюкоза, рибоза и глюкозамин. Изучены спектры поглощения комплекса водорастворимого антигена, охарактеризован состав входящих в него белковых фракций. Показана стабильность характеристик препарата разных серий, что свидетельствует о стандартности технологического процесса получения и позволяет использовать его для оценки формирования поствакцинального противочумного иммунитета в клеточных тестах in vitro в качестве специфического антигена при активации лимфоцитов.

Ключевые слова: комплекс водорастворимых антигенов, противочумный иммунитет, иммунизация, спектрофотометрия, проточная цитофлуориметрия, хроматографический анализ

Для цитирования: Гостищева С.Е., Абзаева Н.В., Ковалев Д.А., Костроминов А.В., Жиров А.М., Ракитина Е.Л., Костюченко М.В., Логвиненко О.В., Пономаренко Д.Г., Русанова Д.В., Иванова М.А., Гридина Т.М. Характеристика качественного состава комплекса водорастворимых антигенов чумного микроба в перспективе использования его при оценке формирования поствакцинального противочумного иммунитета. Бактериология. 2025; 10(2): 15-21.

DOI: 10.20953/2500-1027-2025-2-15-21

Читать полностью PDF-файл