Т.А.Иващенко, Я.О.Романенко, А.С.Карцева, М.В.Силкина, М.А.Марьин, М.М.Рогозин, М.А.Шкуратова, А.Е.Хлынцева, Т.И.Комбарова, В.В.Фирстова

ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Роспотребнадзора, Оболенск, Московская область, Российская Федерация

Резюме: Одним из способов нейтрализации летального токсина (ЛТ) сибирской язвы является применение специфичных к нему моноклональных антител (МКА). В данном исследовании для нейтрализации ЛТ нами была предложена композиция, состоящая из МКА 1Е10, специфичного к IV домену протективного антигена (ПА), и МКА 2D8, специфичного к I домену летального фактора (ЛФ).
Цель. Изучение антитоксического действия МКА 2D8, специфичного к ЛФ, отдельно и совместно с MКА 1E10.
Материалы и методы. Субъединицы ЛТ – полноразмерные ПА и ЛФ B. anthracis были получены в прокариотической системе экспрессии. Для получения необходимого количества МКА гибридомы 1Е10 и 2D8 культивировали в организме мышей до появления асцитных опухолей. МКА из асцитической жидкости выделяли посредством аффинной хроматографии на колонке с сорбентом Protein G Sepharose. Оценку токсин-нейтрализующей активности антител проводили как in vitro, в МТТ-тесте с использованием клеточной линии макрофагов мыши J774А.1, так и in vivo с использованием мышей линии BALb/c.
Результаты. В экспериментах in vitro было показано, что предложенная композиция МКА 1Е10 и 2D8 способна нейтрализовать действие ЛТ в количестве IC100 на 98%. В эксперименте in vivo МКА 2D8 обеспечивало 60% выживае- мость мышей.
Заключение. МКА 2D8, специфичное к I домену ЛФ, может представлять собой дополнительный потенциальный инструмент для терапии сибиреязвенной инфекции. Поскольку IV домен ПА играет ведущую роль в связывании с рецепторами на поверхности эукариотических клеток, а I домен ЛФ необходим для проникновения ЛФ внутрь клетки, то можно предположить, что совместное применение МКА 1Е10 и 2D8 позволит блокировать как проникновение токсина внутрь клетки, так и сборку ЛТ.

Ключевые слова: летальный токсин, моноклональные антитела, протективный антиген, летальный фактор

Для цитирования: Иващенко Т.А., Романенко Я.О., Карцева А.С., Силкина М.В., Марьин М.А., Рогозин М.М., Шкуратова М.А., Хлынцева А.Е., Комбарова Т.И., Фирстова В.В. Изучение антитоксических свойств моноклонального антитела к летальному фактору и его вклад в токсин-нейтрализующее действие сибиреязвенного токсина. Бактериология. 2025; 10(1): 8-16.

DOI: 10.20953/2500-1027-2025-1-8-16

Читать полностью PDF-файл