А.Г.Шевяков, В.А.Яковлева, Е.А.Панферцев, Р.И.Миронова С.Ф.Бикетов, С.С.Ветчинин

ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Роспотребнадзора, Оболенск, Московская область, Российская Федерация

Резюме: Особенностью сибиреязвенных захоронений является длительная персистенция спор патогена в почве. Детекция спор Bacillus anthracis в образцах почвы – сложная и трудоемкая задача, главным образом из-за ингибирующего действия почвенного матрикса, в частности гуминов, на реакции детектирования. Получение моноклональных антител (МКА) к поверхностным антигенам спор открывает перспективу использования иммуномагнитных частиц (ИМЧ) для очистки спор от ингибиторов и повышения эффективности детекции.
Цель работы – получение МКА, специфичных к эпитопам белка BclA, локализованным на поверхности спор B. anthracis.
Разработана генно-инженерная конструкция, обеспечивающая синтез в клетках Escherichia coli рекомбинантного белка rBclA, который использовали для иммунизации мышей BALB/c с последующей гибридизацией клеток спленоцитов с миеломными клетками Sp2/0-Ag14, что привело к получению гибридом-продуцентов МКА к поверхностно локализованным эпитопам на белке BclA сибиреязвенных спор. Для отбора гибридом-продуцентов МКА, специфических к BclA, использовали метод предварительного инкубирования культуральных жидкостей, полученных после культивирования гибридом, со спорами Bacillus cereus и Bacillus thuringiensis и последующим иммуноблоттингом с препаратом экстракта спор B. anthracis. В результате получено 3 гибридомы-продуцента МКА, специфичных к поверхностно расположенным эпитопам белка BclA спор возбудителя сибирской язвы. Специфичность МКА проверили методом дотблота со спорами B. cereus, B. thuringiensis, B. anthracis.

Ключевые слова: сибирская язва, моноклональные антитела, BclA

Для цитирования: Шевяков А.Г., Яковлева В.А., Панферцев Е.А., Миронова Р.И., Бикетов С.Ф., Ветчинин С.С. Получение мышиных моноклональных антител к белку BclA спор Bacillus anthracis. Бактериология. 2024; 9(4): 25-33.

DOI: 10.20953/2500-1027-2024-4-25-33

Читать полностью PDF-файл