В.В.Евдокимова, Д.И.Симакова, Л.П.Алексеева, Д.А.Левченко, М.Г.Мелоян, Е.Н.Сокиркина

ФКУЗ «Ростовский-на-Дону противочумный институт» Роспотребнадзора, Ростов-на-Дону, Российская Федерация

Резюме: Цель исследования – оценить возможность выделения жизнеспособных бактерий Coxiella burnetii из сывороток крови больных острой лихорадкой Ку с использованием клеточных линий и биопробных животных. В исследование взяты сыворотки крови больных, хранившиеся при -80°С. Изоляцию возбудителя лихорадки Ку проводили путем инокуляции сыворотки в культуру клеток Vero E6, Hep-2 и введением в биопробных животных (белые мыши, морские свинки) с последующими многократными пассажами in vivo и in vitro. Для мониторинга роста C. burnetii в культуре клеток и обнаружения ДНК возбудителя в суспензии органов зараженных животных применяли метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).
В данном исследовании была изучена возможность применения культуры клеток для выделения и поддержания непрерывного роста C. burnetii. Изоляция последней была осуществлена из двух образцов сывороток крови с исход- ными значениями Ct 24,63 и Ct 28,04 в ПЦР-анализе. Культивирование возбудителя на клеточных линиях приводило к его элиминации через 3–4 пассажа, длительность которых составляла 7 дней. Пассирование возбудителя в биопробных животных с последующей инокуляцией инфекционного материала (суспензия перитонеальных макрофагов, легких, селезенки) в культуру клеток способствовало поддержанию жизнеспособности коксиелл более длительные сроки. Результаты эксперимента показывают, что стандартные образцы сыворотки, взятые у пациентов с острой лихорадкой Ку, являются ценным источником новых изолятов C. burnetii, причем для сохранения жизнеспособности микроорганизма не требуется особой обработки образцов.

Ключевые слова: лихорадка Ку, Coxiella burnetii, культура клеток, Vero E6, Hep-2, пассаж, макрофаги, биопробные животные

Для цитирования: Евдокимова В.В., Симакова Д.И., Алексеева Л.П., Левченко Д.А., Мелоян М.Г., Сокиркина Е.Н. Опыт изоляции Coxiella burnetii из сывороток крови больных с использованием клеточных линий и биопробных животных. Бактериология. 2024; 9(1): 63-71.

DOI: 10.20953/2500-1027-2024-1-63-71

Читать полностью PDF-файл