А.Г.Шевяков, И.Ю.Щит, В.Н.Борзенков, С.Ф.Бикетов, С.С.Ветчинин

ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Роспотребнадзора, Оболенск, Московская область, Российская Федерация

Резюме: Листериоз – заболевание, вызываемое Listeria monocytogenes, – представляет значительную угрозу жизни и здоровью людей с ослабленной иммунной системой, пожилых и новорожденных. Заболевание проявляется в виде различных патологий центральной нервной системы, менингоэнцефалита, сепсиса, может приводить к выкидышу. Основной путь заражения – алиментарный. Для контроля качества пищевых продуктов необходима разработка новых высокоспецифичных методов контроля патогенных листерий.
В работе показана возможность высокоспецифичного и чувствительного обнаружения патогенных L. monocytogenes с помощью петлевой изотермической амплификации LAMP. Этот метод позволяет амплифицировать небольшое количество копий целевой ДНК с высокой специфичностью, эффективностью и скоростью в изотермических условиях с использованием набора из четырех специально подобранных праймеров и ДНК-полимеразы, способной проводить амплификацию с вытеснением матричной цепи. В связи с этим значительно смягчаются требования к используемому оборудованию, так как отсутствует необходимость в термоциклировании, и квалификации персонала. Предложенный метод позволяет обнаружить 1,7•10¹ КОЕ/мл патогенных листерий при использовании двух наборов специально подобранных праймеров для LAMP – Lm-prfa и Lm-iap.

Ключевые слова: листериоз, Listeria monocytogenes, петлевая изотермическая амплификация, LAMP

Для цитирования: Шевяков А.Г., Щит И.Ю., Борзенков В.Н., Бикетов С.Ф., Ветчинин С.С. Разработка дуплексной петлевой изотермической амплификации LAMP для детекции Listeria monocytogenes. Бактериология. 2023; 8(3): 48-55.

DOI: 10.20953/2500-1027-2023-3-48-55

Читать полностью PDF-файл