Получение и определение концентрации в культуральной жидкости фаэцина – пептидного бактериоцина Enterococcus faecium

В.М.Борзенков, В.П.Левчук, В.И.Суровцев

ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Роспотребнадзора, Оболенск, Московская область, Российская Федерация

Резюме: Фаэцин – пептидный бактериоцин с молекулярной массой ~5кДа – получен и очищен до электрофоретически чистого состояния с выходом ~70% от общей активности в культуральной жидкости (КЖ). Метод времяпролетной масс-спектрометрии показал, что бактериоцин состоит из двух компонентов А и В с близкими молекулярными массами. В ранее опубликованных работах выход очищенных бактериоцинов, как правило, не превышал 4–5% от общей активности в КЖ. Авторы полагают, что увеличение выхода связано с тем, что учитывалось не только сходство пептидных бактериоцинов с высокомолекулярными белками, но и отличия, связанные с малой молекулярной массой, способностью к гидрофобному взаимодействию при нейтральных и слабощелочных значениях pH и устойчивостью к денатурации. Использование метода Скоупса позволило определить концентрацию фаэцина на конечной стадии очистки и в КЖ в абсолютных единицах (мг/л). Описанные в работе методы очистки с высоким выходом, вероятно, применимы и для других бактериоцинов вследствие близости их физико-химических свойств.

Ключевые слова: Enterococcus faecium, Listeria monocytogenes, бактериоцин, фаэцин, культуральная жидкость, адсорбционная хроматография, уравнение Скоупса

Для цитирования: Борзенков В.М., Левчук В.П., Суровцев В.И. Получение и определение концентрации в культуральной жидкости фаэцина – пептидного бактериоцина Enterococcus faecium. Бактериология. 2020; 5(4): 20-24.

DOI: 10.20953/2500-1027-2020-4-20-24

Читать полностью PDF-файл