Н.А.Шишкова, Г.М.Вахрамеева, В.М.Павлов, А.Н.Мокриевич, И.А.Дятлов

ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Роспотребнадзора, Оболенск, Московская область, Российская Федерация

Резюме: Проведена оптимизация условий плазмидной криотрансформации вакцинного штамма F. tularensis 15 НИИЭГ. В экспериментах использовали плазмидный вектор pPMC1, способный автономно реплицироваться в бактериях рода Francisella. Показаны необходимость наличия ионов магния в трансформационном буфере и важность использования минимального объема трансформационной смеси при замораживании-оттаивании. Оптимизированный протокол позволяет получать до 1×10⁷ трансформантов на 1 мкг плазмидной ДНК, что сравнимо с эффективностью электропорации плазмидной ДНК pPMC1 в клетки туляремийного вакцинного штамма.

Ключевые слова: Francisella tularensis 15 НИИЭГ, криотрансформация, оптимизация, фаза роста

Для цитирования: Шишкова Н.А., Вахрамеева Г.М., Павлов В.М., Мокриевич А.Н., Дятлов И.А. Плазмидная криотрансформация вакцинного штамма Francisella tularensis 15 линии НИИЭГ. Бактериология. 2018; 3(2): 38-42.

DOI: 10.20953/2307-6631-2018-2-38-42

Читать полностью PDF-файл