Дифференциация шести видов листерий с помощью ПЦР-ПДРФ анализа ITS-последовательностей, локализованных между генами 16S и 23S рРНК

Э.А.Светоч1, Е.И.Асташкин1, В.Н.Борзенков1, О.И.Тазина1, Н.Н.Карцев1, Н.Р.Ефимочкина2, И.П.Мицевич1, Н.К.Фурсова1

1ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Роспотребнадзора, Оболенск, Российская Федерация
2ФГБУ «НИИ питания РАН», Москва, Российская Федерация

Резюме: Предлагаемый метод дифференциации шести видов бактерий рода Listeria основан на анализе полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ) внутреннего транскрибируемого спейсера (ITS-локуса), расположенного между генами 16S и 23S рРНК. ITS-локус амплифицировали с помощью специфичных праймеров G1 и L1 и последовательно гидролизовали эндонуклеазами рестрикции BseMII, ScaI и TasI. Длины рестрикционных фрагментов анализировали с помощью электрофореза в агарозном геле. Данная схема позволила на первом этапе дифференцировать листерии патогенного для человека вида Listeria monocytogenes, на втором – листерии вида Listeria innocua, а на третьем – остальные четыре вида листерий – патогенный для животных Listeria ivanovii и непатогенные Listeria seeligeri, Listeria welshimeri и Listeria grayi.

Ключевые слова: Listeria spp., ПЦР-ПДРФ анализ, ITS-локус, 16S-23S рРНК

Для цитирования: Светоч Э.А., Асташкин Е.И., Борзенков В.Н., Тазина О.И., Карцев Н.Н., Ефимочкина Н.Р., Мицевич И.П., Фурсова Н.К. Дифференциация шести видов листерий с помощью ПЦР-ПДРФ анализа последовательностей ДНК между генами 16S и 23S рРНК. Бактериология. 2017; 2(1): 46-53.

DOI: 10.20953/2500-1027-2017-1-46–53

Читать полностью PDF-файл